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CCK-8试剂盒检测步骤
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产 品: 浏览次数:15CCK-8试剂盒检测步骤 
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发布时间: 2019-06-05 09:27:52
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详细信息
 CCK-8试剂盒  

CCK-8试剂盒利用了同仁化学研究所(Dojindo)开发的四唑盐——WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),它在电子载体1-MethoxyPMS存在的情况下能够被还原成水溶性的甲臜染料。CCK-8溶液可以?#33519;?#21152;入到细胞样品中;不需要预配各种成分。CCK-8法是用于测定细胞增殖或细胞毒性试验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK-8被细胞内脱氢酶生物还原后生成的橙色甲臜染?#22799;?#22815;溶解在组织培养基中,生成的甲臜量与活细胞数量成正比。WST-8法检测细胞增殖、细胞毒性实验的灵敏度比其它四唑盐如MTT,XTT,MTSWST-1高。由于CCK-8溶液相当稳定,并且对细胞没有毒性,因此可以长时间孵育。  

CCK-8试剂盒检测步骤  

1.向各孔中加入100μl细胞悬液。a)  

2.37℃下预孵育培养板。b)  

3.向各孔中加入各浓度的待测溶液c)10μl。  

4.37℃下孵育。  

5.向各孔中加入10μlCCK-8溶液d)。  

6.37℃下孵育1-4小时。e)  

7.测定450nm处的OD值。  

a)使用适当的培养基制备50,000-100,000/ml的细胞悬液。  

b)建议使用CO2培养箱过夜预培养。  

c)使用培养基或PBS来制备溶液。  

d)如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有CCK-8的待测溶液在450nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以?#33519;?#21152;入CCK-8,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的100μl培养基和10μlCCK-8进行检测。  

e)白细胞可能需要培养较长时间。  

活力计算  

细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A0加药)-A(空白)]×100  

A(加药):具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度  

A(空白):具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度  

A0加药):具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度  

*细胞活力?#21512;?#32990;增殖活力或细胞毒性活力  

更多:CCK-8试剂盒  http://www.shbioyc.com/SonList-1110906.html  

http://www.hbzhan.com/st606571/

 

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